實(shí)驗(yàn)動物免疫方案

實(shí)驗(yàn)動物免疫方案

1、抗原: 蛋白質(zhì)、多肽、細(xì)胞器、細(xì)胞、組織等。

2、免疫方式：皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。

3、不同動物免疫所需抗原量（以蛋白免疫為例）

>18-20kDa                  <18-20kDa

動物     抗原量    *抗原量     抗原量    *抗原量

兔子     20-200        100         50-400       200

小鼠     2-40          15           4-60         40

大鼠     10-50         30          20-150        50

綿羊    100-1000       200         200-1000      400

母雞     20-200        100          50-400       200

單位：微克

4、免疫方案（以免疫兔子為例）：

天數(shù)    0       14       28       38      56      66        87

注射    x        x        x                x

采血   2ml                        2ml           2+20ml     2+50-70ml

5、注意：

1）*次免疫用*佐劑與免疫原混合，以后加強(qiáng)免疫用不*佐劑與免疫原混合，采取多點(diǎn)，時間間隔式免疫法。

2） 如果用細(xì)胞免疫兔子，那么每次免疫所需細(xì)胞量為2-3 x 10⁷ cells。

3） 在連續(xù)免疫完三次后，需要少量取血進(jìn)行ELISA檢測，檢測所免疫動物的抗體滴度，一般滴度能達(dá)到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動物前一周應(yīng)加強(qiáng)一次免疫。

4） 如果用小鼠免疫，可以尾靜脈小量采血（大約50µl），zui后取眼球大量采血（大約500-1000µl）；如果用兔子免疫，可以耳緣靜脈小量取血（大約2mL），zui后心臟大量取血（50-100mL）

5） 按血清制備的標(biāo)準(zhǔn)方法將血清分離，并且分裝成小份，儲藏在-80^oC。