研域課堂：血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的詳解

ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標本，標本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因，攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類：

1、外源性物質(zhì)
 
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標本的收集、儲存等不當(dāng)所形成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
 
1)標本溶血
 
因為各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，攪擾測定成果。
 
2)標本受細菌污染：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。

2、內(nèi)源性物質(zhì)
 
常見的攪擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
 
1)類風(fēng)濕因子：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA試劑盒檢測中，可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
 
2)補體：ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被露出出來，使C1q能夠?qū)⒍哌B接起來，然后形成檢測OD值偏高。
  
3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來，也能形成檢測OD值偏高。
  
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA試劑盒測定成果有攪擾效果。